夜惊魂

故事
在布鲁克林区，赖瑞·达理是个刚离婚、想要发明新玩意但总是换工作和住处的人。他的前妻艾莉卡对他的情况感到有点同情，但她认为他不是他们10岁的儿子尼克的好榜样。尼克正在考虑要不要放弃打冰球，打算长大后要当一名像他妈妈的未婚夫唐那样的股票经纪人；而赖瑞担心尼克更欣赏唐而不是他，尤其是在尼克选择邀请唐到学校的职业日介绍工作后。后来，赖瑞在自然历史博物馆找到了一份夜间保全的工作，取代了要退休的保全赛西·佛莱德里克以及他的同事葛斯和雷金纳德。赛西在交接时给了赖瑞一本特殊的手册，提醒他千万不要「让什么东西进来…或者走出去」。
上班的第一晚，赖瑞发现博物馆的展品夜晚会动起来，包括：超爱玩的暴龙骨头「Rexy」；超皮的白面狨猴Dexter，它不只搞砸了赖瑞的手册，还偷了他的钥匙；还有模仿古西部、古罗马和古玛雅的小人国；嚼口香糖的复活节岛石头大佬；以及像匈奴王阿提拉、南北战争的士兵、喜欢放火的原始人，还有被关在玻璃柜里、啥都听不到的萨卡加维亚的蜡像。赖瑞差点跟两个小头目杰迪迪亚和奥克塔维斯起冲突，还好被骑马的泰迪·罗斯福救了一命。泰迪说，自从1952年那块古埃及的金色石板 - 法老阿克梅拉的神祕石板来到博物馆，展品每晚都会活蹦乱跳，但如果日出前还不回到馆内，它们会变成灰。在泰迪帮忙搞定一切后，赖瑞发现他其实有点喜欢萨卡加维亚，但就是不敢开口跟她说。
赛西、雷金纳德和葛斯来找赖瑞，他本来想辞职，但尼克和唐来恭贺他新工作，让他决定为了儿子再努力。赛西建议他多读历史知识。赖瑞渐渐能够控制这些展品，但那群原始人在自己的区域搞出火灾，他只好赶紧扑灭；同时，Dexter又偷了他的钥匙，打开开窗放了一个原始人逃出去，那原始人看到街上一群流浪汉生火就跳窗出去了。赖瑞没救得回那逃出去的原始人，被日出的太阳照到变成灰，最后被街道清洁车给扫走。博物馆馆长麦菲博士看到被破坏的原始人展品，就要炒赖瑞鱿鱼，而且还被儿子尼克和同学看到。但赖瑞说服麦菲再给他一次机会。蕾贝卡·哈特曼是博物馆的导遊也是研究萨卡加维亚的历史学者，当赖瑞告诉她博物馆的夜间秘密时，她以为赖瑞在取笑她。
夜晚，赖瑞带尼克到博物馆想见识一下，但这晚却没有任何东西活过来。他们发现赛西、葛斯和雷金纳德正在盗窃金石板。就像博物馆的展品一样，这三位老警卫因为石板的能力而变得精力充沛。他们一直策划要偷这石板还有其他值钱的展品，然后把罪名赖到赖瑞头上。尼克转动开关，让石板恢复活力，博物馆的展品又再次活过来，于是在馆内开始了一场追逐战。但最后赛西把石板抢走，并把尼克和赖瑞锁在埃及展室。赖瑞从棺材里释放出法老阿克梅拉的木乃伊，帮助他们逃脱，却发现其他的展品人物分成了不同的历史和政治阵营正在互相打斗，赖瑞说服他们团结起来，并指挥各人抓住那三位警卫并找回那片石板。
葛斯和雷金纳德被抓住，但赛西驾驶着邮政马车逃跑了。泰迪为了保护萨卡加维亚把她推了出去，自己被车撞成两半，但还活着。赖瑞追着赛西跑到中央公园，这时，Jedediah和Octavius驾驶着玩具车，加上Rexy从前面冲向赛西，打算拦截他。赛西看到前面的情形，在快对撞时立刻紧急转弯，Jedediah和Octavius两人失控翻车。赖瑞在这次混乱中终于追上了赛西。赛西嘲笑赖瑞，以为他不知道如何操作马车的煞车暗语，但赖瑞经过学习是懂得暗语的，并成功地命令马车急刹，赛西被弹飞出去，成功阻止他并取回石板。当萨卡加维亚帮忙修复泰迪时，他们两人终于拉近了关系。蕾贝卡看到展品回到博物馆，终于明白了事情的真相，赖瑞也把她介绍给萨卡加维亚。隔天，前一晚的种种怪事，例如原始人在博物馆地铁站留下的洞穴划，还有中央公园的暴龙脚印等事件登上了电视新闻，麦菲博士原本打算炒赖瑞鱿鱼，但看到新闻带动了博物馆的入馆人数后，决意留用赖瑞，且那晚和尼克、蕾贝卡还有所有展品一起开了个派对庆祝。
在片尾彩蛋，作为对赛西、葛斯和雷金纳德在罪行的惩罚，他们被迫当上博物馆的清洁工，划面中显示他们一边拖地一边跳舞，正在清理派对后的残局。